Laboratórne pestované kultúry ľudských buniek sa často používajú v biomedicínskom výskume a pri vývoji nových ošetrení. Medzi mnohými bunkovými líniami je jednou z najznámejších HeLa. Tieto bunky, napodobňujúce ľudské telo in vitro („in vitro“), sú „večné“- môžu sa nekonečne deliť, výsledky výskumu, ktoré ich používajú, sa spoľahlivo reprodukujú v rôznych laboratóriách. Na svojom povrchu nesú pomerne univerzálny súbor receptorov, ktorý im umožňuje ich štúdium účinku rôznych látok, od jednoduchých anorganických látok po proteíny a nukleové kyseliny; sú nenáročné na kultiváciu a dobre tolerujú zmrazenie a konzerváciu.
Tieto bunky sa dostali do veľkej vedy celkom nečakane. Boli vzatí od ženy menom HEnrietta LAcks, ktorá krátko nato zomrela. Bunková kultúra nádoru, ktorý ju zabil, sa však ukázala ako nevyhnutný nástroj pre vedcov.
Dozvieme sa viac o tomto …
Henrietta chýba
Henrietta Lacksová bola krásna čierna americká žena. Žila v malom meste Turner v Južnej Virgínii so svojím manželom a piatimi deťmi. 1. februára 1951 odišla Henrietta do nemocnice Johns Hopkins Hospital - obávala sa jej zvláštneho prepustenia, ktoré pravidelne objavovala na spodnom prádle. Lekárska diagnóza bola hrozná a nemilosrdná - rakovina krčka maternice. O osem mesiacov neskôr, napriek chirurgickému zákroku a ožarovaniu, zomrela. Mala 31 rokov.
Zatiaľ čo Henrietta bola v nemocnici Hopkins, ošetrujúci lekár poslal nádorové bunky získané biopsiou na analýzu Georgeovi Gayovi, vedúcemu výskumného laboratória tkanivových buniek v nemocnici Hopkins Hospital. V tom čase bola kultivácia buniek mimo tela iba vo fáze formovania a hlavným problémom bola nevyhnutná bunková smrť - po istom počte divízií zomrela celá bunková línia.
Propagačné video:
Ukázalo sa, že bunky označené ako „HeLa“(skratka pre priezvisko a priezvisko Henrietta Laxovej) sa množia oveľa rýchlejšie ako bunky z normálnych tkanív. Okrem toho malígna transformácia urobila tieto bunky nesmrteľnými - ich program na potlačenie rastu bol po určitom počte divízií vypnutý. S inými bunkami sa to nikdy predtým nestalo in vitro. Toto otvorilo nebývalé perspektívy v biológii.
V skutočnosti nikdy predtým nemohli vedci považovať výsledky získané v bunkových kultúrach za úplne spoľahlivé: všetky experimenty sa uskutočňovali na rôznych bunkových líniách, ktoré nakoniec zomreli - niekedy dokonca predtým, ako mohli dosiahnuť akékoľvek výsledky. A potom sa vedci stali vlastníkmi prvej stabilnej a dokonca večnej (!) Bunkovej línie, ktorá adekvátne napodobňuje vlastnosti organizmu. A keď sa zistilo, že bunky Hela môžu prežiť poštu, Gay ich poslal kolegom po celej krajine. Veľmi skoro sa zvýšil dopyt po HeLa bunkách a tieto sa replikovali v laboratóriách po celom svete. Stali sa prvou bunkovou líniou „šablóny“.
Stalo sa tak, že Henrietta zomrela v ten istý deň, keď George Gay hovoril pred televíznymi kamerami a držal skúmavky so svojimi bunkami. Uviedol, že sa začala éra nových perspektív v objavovaní drog a biomedicínskom výskume.
Prečo sú jej bunky také dôležité?
A mal pravdu. Bunková línia, identická vo všetkých laboratóriách na svete, umožnila rýchlo získať a nezávisle potvrdiť stále viac nových údajov. Môžeme s istotou povedať, že obrovský skok v molekulárnej biológii na konci minulého storočia bol spôsobený schopnosťou kultivovať bunky in vitro. Bunky Henrietta Lacks boli prvými nesmrteľnými ľudskými bunkami, ktoré sa kedy pestovali v umelých kultivačných médiách. HeLa vyškolila vedcov, aby kultivovali stovky ďalších rakovinových bunkových línií. Aj keď v posledných rokoch sa priorita v tejto oblasti posunula smerom k bunkovým kultúram normálnych tkanív a vyvolala pluripotentné kmeňové bunky (japonská vedkyňa Shinya Yamanaka získala Nobelovu cenu za rok 2012 vo fyziológii alebo medicíne za objav metódy na návrat dospelých buniek do embryonálneho stavu),napriek tomu rakovinové bunky zostávajú akceptovaným štandardom v biomedicínskom výskume. Hlavnou výhodou HeLa je nekontrolovateľný rast na jednoduchých živných médiách, čo umožňuje rozsiahly výskum pri minimálnych nákladoch.
Od smrti Henrietta Lacks sa jej nádorové bunky neustále používajú na štúdium molekulárnych vzorcov vývoja rôznych chorôb, vrátane rakoviny a AIDS, na štúdium účinkov žiarenia a toxických látok, na vypracovanie genetických máp a obrovské množstvo ďalších vedeckých problémov. V biomedicínskom svete sa bunky HeLa stali rovnako slávnymi ako laboratórne potkany a Petriho misky. V decembri 1960 boli bunky HeLa ako prvé lietajúce do vesmíru v sovietskom satelite. Dokonca aj dnes je rozsah experimentov sovietskych genetikov vo vesmíre pozoruhodný. Výsledky ukázali, že HeLa sa darí nielen v suchozemských podmienkach, ale aj v nulovej gravitácii.
Bez buniek HeLa by bol vývoj vakcíny proti detskej obrne vyvinutej Jonasom Salkom nemožný. Mimochodom, Salk si bol taký istý v bezpečnosti vakcíny, ktorú dostal (oslabený vírus detskej obrny), že si ako dôkaz spoľahlivosti svojho lieku vstrekol sám seba, svoju manželku a tri deti.
Od tej doby sa HeLa používa na klonovanie (predbežné experimenty na transplantácii bunkových jadier pred klonovaním sa uskutočnili slávne ovce Dolly na HeLa), na testovanie metód umelej inseminácie a tisíce ďalších štúdií (niektoré z nich sú uvedené v tabuľke).
Okrem vedy …
Samotná osobnosť spoločnosti Henrietta Lacks nebola dlho inzerovaná. Gay samozrejme nebol pôvod buniek HeLa tajomstvom, veril však, že súkromie je prioritou a rodina Laxovcov mnoho rokov nevedela, že bunky Henrietty sú známe po celom svete. Tajomstvo bolo odhalené až po smrti doktora Gaya v roku 1970.
Pripomeňme, že štandardy sterility a techniky práce s bunkovými líniami boli v tom čase ešte v plienkach a niektoré chyby sa objavili až o niekoľko rokov neskôr. Takže v prípade HeLa buniek - po 25 rokoch vedci zistili, že mnohé z bunkových kultúr používaných vo výskume, pochádzajúcich z iných typov tkanív, vrátane buniek rakoviny prsníka a prostaty, boli infikované agresívnejšími a húževnatejšími HeLa bunkami. Ukázalo sa, že HeLa sa môže pohybovať s prachovými časticami vo vzduchu alebo na nedostatočne umytých rukách a zakoreniť v kultúrach iných buniek. To spôsobilo veľký škandál. Dúfajúc, že sa problém vyrieši genotypizáciou (sekvenovanie je úplné čítanie genómu - vtedy sa plánovalo len ako veľkolepý medzinárodný projekt),jedna skupina vedcov vystopovala príbuzných Henrietty a požiadala o vzorky DNA z rodiny, aby zmapovala gény. Takto bolo odhalené tajomstvo.
Mimochodom, Američania sa stále viac obávajú skutočnosti, že rodina Henrietty nikdy nedostala kompenzáciu za používanie buniek HeLa bez súhlasu darcu. Rodina žije dodnes s veľmi nízkou prosperitou a finančná pomoc by bola veľmi užitočná. Všetky žiadosti však narazia na prázdnu stenu - dlho neexistujú respondenti a Lekárska akadémia a ďalšie vedecké štruktúry sa s touto témou pravdepodobne nechcú zaoberať.
Dňa 11. marca 2013 bola do ohňa pridaná nová publikácia, v ktorej boli prezentované výsledky kompletnej genómovej sekvencie bunkovej línie HeLa. Experiment sa opäť uskutočnil bez súhlasu potomkov Henrietty a po určitej etickej kontroverzii bol povolený úplný prístup k genomickým informáciám iba odborníkom. Úplná genomická sekvencia HeLa má napriek tomu veľký význam pre následnú prácu, ktorá umožňuje použitie bunkovej línie v budúcich genomických projektoch.
Skutočná nesmrteľnosť?
Zhubný nádor, ktorý zabil Henriettu, spôsobil, že jej bunky boli potenciálne nesmrteľné. Chcela táto žena nesmrteľnosť? A dostala to? Ak o tom premýšľate, vzniká fantastický pocit - časť živého človeka, umelo vynásobená, vydrží milióny testov, „ochutná“všetky drogy predtým, ako sa testujú na zvieratách, je molekulárnymi biológmi na celom svete uchytená do jadra …
To všetko, samozrejme, nemá nič spoločné s „životom po živote“. Je hlúpe veriť, že v bunkách Hela, ktoré neustále mučia nenásytní vedci, je aspoň časť duše nešťastnej mladej ženy. Okrem toho sa tieto bunky môžu považovať za ľudské iba čiastočne. V jadre každej HeLa bunky je 76 až 82 chromozómov v dôsledku transformácie, ktorá nastala počas malignity (normálne ľudské bunky obsahujú 46 chromozómov), a táto polyploidia pravidelne vyvoláva diskusie o vhodnosti HeLa buniek ako modelu ľudskej fyziológie. Navrhlo sa dokonca izolovať tieto bunky na samostatný druh blízky ľudskému druhu, ktorý sa volá Helacyton gartleri, na počesť Stanleyho Gartlera, ktorý tieto bunky študoval, ale dnes sa o tom vážne nehovorí.
Vedci si však vždy uvedomujú obmedzenia, ktoré je potrebné zohľadniť. Po prvé, HeLa napriek všetkým zmenám zostáva ľudskými bunkami: všetky ich gény a biologické molekuly zodpovedajú ľudským a molekulárne interakcie sú v drvivej väčšine prípadov identické s biochemickými cestami zdravých buniek. Po druhé, polyploidia robí túto líniu pohodlnejšou pre genomické štúdie, pretože množstvo genetického materiálu v jednej bunke sa zvyšuje a výsledky sú jasnejšie a kontrastnejšie. Po tretie, široká distribúcia bunkových línií po celom svete vám umožňuje ľahko opakovať experimenty kolegov a publikované údaje použiť ako základ pre váš vlastný výskum. Po zistení základných faktov o modeli HeLa (a každý si pamätá, že je to dokonca aj pohodlný, ale iba model tela),vedci sa ich snažia replikovať na vhodnejšie modelové systémy. Ako vidíte, HeLa a podobné bunky dnes predstavujú základ celej vedy. A napriek etickým a morálnym sporom si dnes chcem uctiť spomienku na túto ženu, pretože jej nedobrovoľný príspevok k medicíne je neoceniteľný: bunky, ktoré zostali po nej, zachránili a zachránili viac životov, ako dokáže ktorýkoľvek lekár.
Držitelia mobilných záznamov
Nesmrteľnosť HeLa buniek je spojená s následkami infekcie ľudským papilomavírusom HPV18. Infekcia spôsobila triplodiu mnohých chromozómov (vytvorenie troch kópií namiesto zvyčajného páru) a rozdelenie niektorých z nich na fragmenty. Okrem toho sa v dôsledku infekcie zvýšila aktivita mnohých regulátorov bunkového rastu, ako sú gény telomeráza (regulátor bunkovej smrti) a c-Myc (regulátor aktivity syntézy mnohých proteínov). Tieto jedinečné (a náhodné) zmeny urobili HeLa bunky rekordom pre rýchlosť rastu a rezistenciu, dokonca aj medzi inými rakovinovými bunkovými líniami, ktorých je dnes niekoľko stoviek. Okrem toho sa ukázalo, že získané zmeny v genóme sú veľmi stabilné a laboratórne podmienky zostávajú v posledných rokoch nezmenené.
Čoskoro po Henrietinej smrti sa začala vytvárať továreň HeLa, čo je veľký podnik, ktorý by umožňoval týždenne pestovať bilióny HeLa buniek. Továreň bola postavená z jediného dôvodu - zastaviť detskú obrnu.
Do konca roku 1951, najväčšia epidémia detskej obrny na svete. Školy boli zatvorené, rodičia boli v panike. Naliehavo bola potrebná vakcína. Vo februári 1952 Jonas Salk z University of Pittsburgh oznámil, že vyvinul prvú vakcínu proti detskej obrne na svete, ale nemohol ju deťom ponúknuť, kým si dôkladne nepreverí jej bezpečnosť a účinnosť. To si vyžadovalo kultivované bunky v takom obrovskom priemyselnom objeme, že ešte nikdy neboli vyrobené.
Národná nadácia pre detskú paralýzu (NFIS), charita založená prezidentom Franklinom Delanom Rooseveltom, ktorý bol paralyzovaný samotnou detskou obrnou, pripravoval najväčšiu poľnú skúšku vakcíny proti detskej obrne v anamnéze. Plánovalo sa, že Salk zaočkuje dva milióny detí a NFIS od nich odoberie krv, aby otestovala imunitu. Ak sa sérum očkovaných detí zmieša so živými vírusmi detskej obrny a kultivovanými bunkami, bude sa musieť vykonať milión neutralizačných testov. Ak vakcína funguje, sérum očkovaných detí by malo blokovať vírus detskej obrny a chrániť bunky. V opačnom prípade vírus infikuje bunky a spôsobuje poškodenie, ktoré vedci vidia pod mikroskopom.
Problém bol v tom, že opičie bunky boli použité na neutralizačné testy, ktoré pri tejto reakcii uhynuli. Bol to problém - nie preto, že sa starali o zvieratá (o tom sa na rozdiel od našej doby nehovorilo), ale preto, že opice boli drahé. Milióny neutralizačných reakcií s opičími bunkami by stáli milióny dolárov, takže NFIS horúčkovito hľadal kultivačnú bunku, ktorá by mohla hromadne hromadiť a stála menej ako opičie bunky.
NFIS sa obrátil na Guye a niekoľko ďalších špecialistov na bunkovú kultúru a Guy si uvedomil, že to bola skutočne zlatá baňa. V dôsledku charity dostalo NFIS v daroch v priemere 50 miliónov dolárov ročne a režisér chcel darovať väčšinu tejto sumy kultivátorom buniek, aby mohli nájsť spôsob hromadnej výroby buniek, o ktorých všetci snívali už mnoho rokov.
Ponuka prišla v pravý čas: šťastnou náhodou krátko po výzve zo strany NFIS, ktorá požiadala o pomoc, si Guy uvedomil, že bunky Henrietty nerástli ako akékoľvek ľudské bunky, s ktorými sa doteraz stretol.
Väčšina buniek v kultúre rastie v jednej vrstve vo forme zrazeniny na povrchu skla, čo znamená, že voľný priestor sa rýchlo vyčerpá. Zvyšovanie počtu buniek je náročné na pracovnú silu: vedci musia bunky zo skúmavky znova a znova zoškrabať a rozdeliť do niekoľkých nových nádob, aby bunkám poskytli nový priestor na rast. Ako sa ukázalo, bunky HeLa sú veľmi nenáročné: nepotrebovali rast skleneného povrchu, mohli rásť vznášaním v kultivačnom médiu, ktoré bolo nepretržite miešané „magickým zariadením“- dôležitou technológiou vyvinutou Guyom, dnes sa to nazýva kultivácia suspenzie. To znamenalo, že bunky HeLa neboli obmedzené priestorom ako všetci ostatní; mohli zdieľať, pokiaľ zostalo kultivačné médium. Čím väčšia je nádoba s kultivačným médiom,čím viac buniek rástlo. Tento objav znamenal, že ak sú bunky HeLa citlivé na vírus detskej obrny (pretože niektoré bunky na to nie sú citlivé), vyriešilo by to problém hromadnej produkcie buniek a zabránilo by sa testovaniu vakcíny na miliónoch opičích buniek.
A tak sa v apríli 1952 Guy a jeho kolega v poradnom výbore NFIS, William Scherer - mladý vedecký pracovník na Minnesotskej univerzite, ktorý nedávno obhajoval svoju tézu - pokúsili infikovať bunky Henrietty vírusom detskej obrny. O niekoľko dní neskôr zistili, že HeLa je v skutočnosti náchylnejšia na vírus ako akékoľvek doteraz kultivované bunky. A uvedomili si, že našli presne to, čo NFIS potrebuje.
Uvedomili si tiež, že predtým, ako mohli začať hromadne vyrábať akékoľvek bunky, potrebovali nájsť nový spôsob prepravy. Odlet lietadla, ktorý použil Guy, bol vynikajúci na posielanie viacerých liekoviek kolegom, ale príliš nákladný na veľké objemy. Ak sa tieto bunky nedajú dodať na správne miesto, budú zbytočné miliardy buniek. Vedci začali experimentovať.
V roku 1952, v deň pamätníka, Guy vzal niekoľko skúmaviek Hela a dostatok kultivačného média, aby vydržali niekoľko dní, aby bunky prežili, a umiestnil ich do plechovej nádoby obloženej korkom a naplnenej ľadom, aby sa zabránilo prehriatiu. Po tom, čo toto všetko poskytol s podrobnými pokynmi na starostlivosť, poslal Mary na poštu, aby poslala balík so skúmavkami do Scherera v Minnesote. Všetky sviatky v Baltimore boli kvôli sviatku zatvorené, s výnimkou centrálnej kancelárie v centre mesta. Aby sa tam dostala, Mary musela vymeniť niekoľko električiek, ale nakoniec sa tam dostala. To isté platí aj pre klietky: o štyri dni neskôr prišiel balík do Minneapolis. Scherer umiestnil bunky do inkubátora a začal rásť. Živé bunky po prvý raz úspešne odložili odoslanie.
V nasledujúcich mesiacoch Guy a Scherer, aby sa ubezpečili, že bunky odolali dlhej ceste v akomkoľvek podnebí, poslali Guy a Scherer trubice HeLa lietadlom, vlakom a kamiónom po celej krajine z Minneapolis do Norwich, New York a späť. Bunky uhynuli iba v jednej skúmavke.
Keď sa NFIS dozvedel, že HeLa je náchylný na vírus detskej obrny a že ho možno pestovať vo veľkých množstvách pri nízkych nákladoch, okamžite sa uzavrela dohoda s Williamom Schererom na dohľad nad rozvojom distribučného centra HeLa na Tuskegee University, jednej z najprestížnejších univerzít v krajine pre čierna. NFIS si pre tento projekt vybrala univerzitu Tuskegee, pretože Charles Bynum, riaditeľ nadácie Negro Activities. Bainum - učiteľ prírodovedných predmetov a aktivista v oblasti občianskych práv a prvý riaditeľ čiernej nadácie v krajine - chcel hostiť centrum v Tuskegee za stovky tisíc dolárov na financovanie, veľa pracovných miest a príležitosti odbornej prípravy pre mladých čiernych vedcov.
V priebehu niekoľkých mesiacov postavil tím šiestich čiernych vedcov a laboratórnych technikov v Tuskegee továreň, ktorú nikdy predtým nevideli: obklad stien lemovali priemyselné oceľové autoklávy na parnú sterilizáciu, obrovské radnice mechanicky miešaného kultivačného média stáli v radoch, inkubátory plné sklenených fliaš na bunkové kultúry a automatické dávkovače buniek sú vysoké, s dlhými, tenkými kovovými držadlami, ktoré injektujú HeLa bunky do jednej skúmavky za druhou. Tím v Tuskegee každý týždeň pripravoval tisíce litrov Guyovho kultivačného média pre recepty, miešal soli, minerály a krvné sérum z desiatok študentov, vojakov a pestovateľov bavlny, ktorí reagovali na inzeráty v miestnych novinách za darovanie krvi za peniaze.
Niekoľko technikov slúžilo ako potrubie na kontrolu kvality a každý týždeň mikroskopovalo stovky tisíc kultúr buniek HeLa, aby sa zabezpečilo, že sú životaschopné a zdravé. Iní zaslali bunky výskumným pracovníkom po celej krajine podľa prísneho plánu v 23 testovacích centrách vakcíny proti detskej obrne.
Tím Tuskegee sa nakoniec rozrástol na 35 vedcov a laboratórnych technikov, ktorí týždenne vyrábali 20 000 skúmaviek HeLa - približne 6 biliónov buniek. Bola to prvá továreň na bunky a začala s jednou rúrkou HeLa, ktorú Guy poslal Schererovi v prvom testovacom balíku krátko po Henrietinej smrti.
Pomocou týchto buniek vedci dokázali účinnosť vakcíny Salk. New York Times čoskoro zverejnili fotografie čiernych žien sklonených nad mikroskopmi, skúmajúcich bunky a držiace skúmavky HeLa v ich čiernych rukách. Nadpis znel:
Čierni vedci a laboratórni technici, mnohí z nich ženy, použili bunky čiernej ženy na záchranu životov miliónov Američanov - väčšina z nich bola biela. A to bolo na tej istej univerzite a v tom istom čase, keď vládni úradníci vykonávali neslávnu štúdiu syfilis.
Centrum Tuskegee pôvodne dodávalo iba bunky HeLa do laboratórií, ktoré testovali vakcíny proti detskej obrne. Keď sa však ukázalo, že existuje dostatok buniek HeLa pre každého, začali sa posielať všetkým vedcom, ktorí boli pripravení ich kúpiť za desať dolárov plus náklady na leteckú poštu. Ak by vedci chceli prísť na to, ako sa bunky budú správať v konkrétnom prostredí, ako reagujú na určitú chemikáliu alebo ako si vytvárajú určitý proteín, obrátili sa na bunky HeLa. Aj keď boli rakovinové, mali všetky základné vlastnosti normálnych buniek: vybudovali proteín a navzájom komunikovali ako normálne bunky, delili a produkovali energiu, prevážali a regulovali genetický materiál a boli náchylní na infekcie, čo z nich robilo optimálny nástroj. syntetizovať a študovať všetkočo je možné - vrátane baktérií, hormónov, proteínov a najmä vírusov.
Vírusy sa množia vstrekovaním častíc ich genetického materiálu do živej bunky. Bunka radikálne mení svoj program a namiesto toho sama začína rozmnožovať vírus. Pokiaľ ide o rastúce vírusy, tak ako v mnohých iných prípadoch, malígna povaha HeLa ich len zvýšila. HeLa bunky rástli oveľa rýchlejšie ako normálne bunky, a preto priniesli výsledky rýchlejšie. HeLa bunky boli pracovným koňom - vytrvalé, lacné a všadeprítomné.
Načasovanie bolo správne. Začiatkom 50. rokov 20. storočia vedci len začínali chápať podstatu vírusov a keď sa v laboratóriách v celej krajine objavili bunky Henrietty, vedci ich začali infikovať všetkými druhmi vírusov - herpesom, osýpkami, príušnicami, ovčími kiahňami, encefalitídou koní - aby študovali, ako vírus preniká. do buniek, množia sa v nich a šíria sa.
Bunky Henrietty pomohli položiť základy virologie, ale to bol len začiatok. V prvých rokoch po Henrietinej smrti vedci z celého sveta po obdržaní prvých skúmaviek so svojimi bunkami dokázali urobiť niekoľko dôležitých vedeckých objavov. Po prvé, tím vedcov použil HeLa na vývoj metód na zmrazenie buniek bez toho, aby sa poškodili alebo zmenili. Prostredníctvom týchto metód sa bunky začali expedovať po celom svete osvedčeným a štandardizovaným spôsobom, ktorý sa používal na prepravu mrazeného jedla a zmrazeného spermy pre živočíšnu výrobu. Znamenalo to tiež, že vedci mohli medzi bunkami udržiavať bunky bez obáv z výživy a sterility. Väčšina vedcov však bola potešená skutočnosťou, že zmrazenie umožnilo „fixáciu“buniek v ich najrôznejších štátoch.
Bunka bola zmrazená ako stlačenie tlačidla pauzy: delenie, metabolizmus a všetky ostatné procesy sa zastavili a obnovili po rozmrazení, akoby ste jednoducho stlačili tlačidlo Štart. Vedci by teraz mohli v priebehu experimentu pozastaviť vývoj buniek s akoukoľvek frekvenciou, aby porovnali reakciu určitých buniek na liek po jednom, dvoch alebo šiestich týždňoch. Mohli pozorovať stav rovnakých buniek v rôznych štádiách vývoja: vedci dúfali, že uvidia, kedy normálna bunka rastúca v kultúre zhubne - jav nazývaný spontánna transformácia.
Mrazenie je prvým v zozname úžasných vylepšení v tkanivovej kultúre vďaka HeLa. Ďalším prielomom je štandardizácia procesu bunkovej kultúry, oblasť, ktorá bola dovtedy neporiadkom. Guy a jeho kolegovia sa sťažovali, že strávili príliš veľa času prípravou kultivačného média a udržiavaním buniek nažive. Čo ich však najviac trápilo, bolo to, že pretože každý použil rôzne zložky na vytvorenie kultivačného média, rôznych receptov, rôznych buniek a rôznych techník a málokto vedel o metódach svojich kolegov, bolo ťažké alebo takmer nemožné replikovať niekoho experiment. Opakovanie je nevyhnutnou súčasťou vedy: objav sa nepovažuje za platný, ak sa ostatní nemôžu opakovať a dosiahnuť rovnaké výsledky. Guy a ďalší sa obávali, že bez štandardizácie metód a materiálov by tkanivová kultúra mohla stagnovať.
Vedci dlho verili, že ľudské bunky obsahujú štyridsaťosem chromozómov - reťazce DNA vo vnútri buniek, ktoré obsahujú všetky naše genetické informácie. Chromozómy sa však navzájom zlepili a nebolo možné ich presne spočítať. V roku 1953 texaský genetik omylom zmiešal nesprávnu tekutinu s HeLa a niektorými ďalšími bunkami. Táto nehoda mala šťastie. Chromozómy v bunkách napučiavali a od seba sa oddeľovali a vedci po prvýkrát boli schopní podrobne preskúmať každý z nich. Tento náhodný objav bol prvý v rade objavov, ktorý dvom vedcom zo Španielska a Švédska umožnil zistiť, že normálna ľudská bunka obsahuje štyridsať šesť chromozómov.
Vedci vedeli, koľko chromozómov by človek mal mať, a vedci by mohli povedať, že niekto má viac či menej as pomocou týchto informácií diagnostikuje genetické choroby. Vedci z celého sveta začali čoskoro identifikovať chromozomálne abnormality. Bolo teda zistené, že pacienti s Downovým syndrómom mali v dvadsiatom prvom páre ďalší chromozóm, pacienti trpiaci Klinefelterovým syndrómom mali ďalší pohlavný x-chromozóm a u pacientov s Shereshevsky-Turnerovým syndrómom tento chromozóm chýba alebo bol chybný.
S týmto novým vývojom sa dopyt po bunkách HeLa zvýšil a stredisko Tuskegee už nedokázalo vyhovieť. Majiteľ mikrobiologických združení - vojenský muž menom Samuel Reeder - nebol informovaný, ale jeho obchodný partner Monroe Vincent bol sám výskumníkom a pochopil, aký veľký je potenciálny trh s bunkami. Mnoho vedcov potrebovalo bunky a len málo z nich malo čas alebo príležitosť ich samy pestovať v dostatočnom množstve. Vedci chceli len kúpiť bunky, a tak sa Reeder a Vincent rozhodli použiť HeLa ako odrazový mostík na spustenie prvého priemyselného obchodného centra na zásobovanie buniek.
Všetko to začalo bunkovou továrňou - ako to nazval Reeder. V Bethesde v Marylande, uprostred priestranného skladu, ktorý bol kedysi továrňou na výrobu čipov Fritos, postavil sklenenú ohradu a nainštaloval pohyblivý dopravný pás so stovkami vstavaných stojanov na skúmavky. Mimo sklenenej miestnosti bolo všetko organizované takmer ako v Tuskegee - obrovské nádrže kultivačného média, len väčšie. Keď boli klietky pripravené na odoslanie, zazvonil hlasný zvon a všetci pracovníci továrne vrátane zamestnancov poštového oddelenia prerušili súčasné podnikanie, riadne sa umyli v sterilizačnej miestnosti, obliekli si plášť a čiapku a postavili sa na dopravný pás. Niektoré naplnené skúmavky, iné ich uzavreli gumovými zátkami, zapečatili alebo umiestnili do prenosného inkubátora,kde boli uskladnené až do balenia na prepravu.
Laboratóriá ako Národné zdravotné ústavy boli najväčšími zákazníkmi mikrobiologických spolupracovníkov a neustále si objednávali milióny buniek HeLa podľa stanoveného harmonogramu. Vedci z ktoréhokoľvek miesta na svete však mohli zadať objednávku, zaplatiť menej ako päťdesiat dolárov a mikrobiologickí spolupracovníci im okamžite poslali skúmavky buniek HeLa. Čitateľ podpísal dohodu s niekoľkými významnými leteckými spoločnosťami, a preto, kdekoľvek objednávka prišla, kuriér poslal bunky pri nasledujúcom lete, boli vyzdvihnuté na letisku a doručené do laboratórií taxíkom. Takto sa zrodilo mnoho miliárd dolárových odvetví ľudských biomateriálov postupne.
Bunky Henrietty nedokázali obnoviť mladosť ženským krkom, ale kozmetické a farmaceutické spoločnosti v Európe a Spojených štátoch ich začali používať namiesto laboratórnych zvierat na testovanie nových výrobkov a liekov, ktoré spôsobujú deštrukciu alebo poškodenie buniek. Vedci znížili HeLa bunky na polovicu a dokázali, že bunky môžu žiť po odstránení jadra, použili ich na vývoj metód vstrekovania látok do bunky bez toho, aby ju zabili. HeLa sa používa na porozumenie účinkov steroidov, chemoterapie liekov, hormónov, vitamínov a stresu v životnom prostredí; boli infikovaní tuberkulózou, salmonelou a baktériami, ktoré spôsobujú vaginitídu.
V roku 1953 vzal Guy na žiadosť vlády USA so sebou Henriettovu bunku na Ďaleký východ, aby študoval hemoragickú horúčku, ktorá zabila amerických vojakov. Injikoval HeLa potkanom a zistil, či majú rakovinu. Z veľkej časti sa však snažil presunúť z Hela k rastúcim normálnym a rakovinovým bunkám od jedného pacienta, aby ich navzájom porovnal. Nemohol uniknúť zdanlivo nekonečným otázkam o HeLa a bunkovej kultúre od iných vedcov. Vedci každý týždeň opakovane navštevovali jeho laboratórium so žiadosťou, aby ich naučili technike, a často musel cestovať po celom svete, čím pomohol nastúpiť prácu na množení buniek.
Mnohí z Guyových kolegov trvali na tom, že zverejnil výskumné údaje a získal uznanie, ktoré si zaslúži, ale vždy ho odradilo od práce. Celú noc pracoval doma. On meškal s termínom na prípravu dokumentov o grante, často sa oneskoroval s odpoveďami na listy o niekoľko mesiacov, a raz zaplatil mzdu zosnulého zamestnanca tri mesiace predtým, ako si to niekto všimol. Mary a Margaret po celý rok zavrčali, keď prinútili Georgea zverejniť čokoľvek o pestovaní Hela; nakoniec napísal pre konferenciu krátky odsek. Margaret potom písala o svojej práci na svojom mieste a rozprávala sa o publikovaní.
V polovici 50. rokov mnoho vedcov už pracovalo s bunkovými kultúrami a Guy bol unavený. Napísal priateľom a kolegom: „Niekto musí prísť na to, ako nazvať to, čo sa teraz deje, povedzme:„ Svet sa zbláznil rastom tohto tkaniva a jeho možnosťami. “Dúfam, že aspoň niektoré z týchto diskusií o pestovaní tkanív majú nadáciu a prospeli ľuďom … a predovšetkým chcem, aby sa tento humbuk trochu ustúpil … “
Guy bol naštvaný humbukom okolo Hela. Koniec koncov, boli tu aj ďalšie bunky, vrátane tých, ktoré sám vyrastal: A. Fi. a D-1 Re, pomenované pre pacientov, od ktorých bola odobratá pôvodná vzorka. Guy ich vedcom ponúkol stále, ale tieto bunky sa pestovali ťažšie, a preto sa im nikdy nepáčila popularita buniek Henrietta. Guy už nerozdeľoval HeLa, keďže spoločnosti prevzali úlohu, ale nepáčilo sa mu, že kultivácia HeLa bola úplne mimo jeho kontrolu.
Odkedy bol výrobný závod v Tuskegee uvedený do prevádzky, poslal Guy vedcom listy v snahe obmedziť používanie HeLa buniek. V liste svojmu starému priateľovi Charlesovi Pomeratovi sa raz sťažoval, že všetci okolo, vrátane personálu Pomeratovho laboratória, používajú HeLa na výskum, čo Guy bol „schopný“a niektorí už tak urobili, ale zatiaľ výsledky nezverejnili. … Pomerat napísal v odpovedi:
Čo sa týka vášho … nesúhlasu s rozsiahlou štúdiou kmeňa HeLa, nechápem, ako môžete dúfať, že veci spomalíte, pretože vy sami ste tento kmeň rozšírili natoľko, že ho teraz môžete kúpiť za peniaze. Je to takmer to isté, ako keď žiadate ľudí, aby experimentovali so zlatými škrečkami!.. Chápem, že verejnosti sa sprístupnili bunky HeLa iba vďaka vašej láskavosti. Tak prečo si teraz vlastne myslíte, že si každý chce vziať kus pre seba?
Pomerat veril, že Guy mal dokončiť svoj vlastný výskum HeLa skôr, ako „prepustí [HeLa] pre širokú verejnosť, pretože potom sa kultúra stane univerzálnym vedeckým vlastníctvom.“
Guy to však neurobil. Hneď ako sa bunky HeLa stali „univerzálnym vedeckým vlastníctvom“, ľudia sa začali čudovať, kto bol ich darcom.